复旦大学873遗传学与细胞生物学基因定点突变
摘要：
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目的：把目的基因上面的一个碱基换成另外一个碱基。原理：通过设计引物，并利用PCR将模板扩增出来，然后去掉模板，剩下来的就是我们的PCR产物，在PCR产物上就已经把这个点变过来了，然后再转化，筛选阳性克隆，再测序确定。引物设计原则：突变引物设计的特殊原则：（1）通常引物长度为25~45bp，我们建议引物长度为30~35bp。一般都是以要突变的碱基为中心，加上两边的一段序列，两边长度至少为11-12bp。若两边引物太短了，很可能会造成突变实验失败，因为引物至少要11-12个bp才能与模板搭上，而这种突变PCR要求两边都能与引物搭上，所以两边最好各设至少12个bp，并且合成多一条反向互补的引物。...
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